实时搜索: microrna如何检测

microrna如何检测

407条评论 4537人喜欢 2146次阅读 560人点赞
最近在做microRNA的荧光素酶靶基因验证,靶基因的3’-UTR已经连接到了psicheck2的载体上,这个是公司做的,是鼠源的,而我用的mimics 也是鼠源的,转染自己的鼠源细胞效率很低,看很多文献上都是用HEK293细胞来转染的,但HEK293是人源的, 请问这个会影响实验结果吗?不同源的可以转染吗?? , microRNA一般是处理细胞多久以后检测的,我用菌感染细胞,检测几个指标。发现3h后,指标的mRNA变化最明显,但是蛋白水平的明显变化要到较晚的时间才出现。所以我检测microRNA的表达谱变化,是应该在mRNA变化最大的送测序么?但是感觉其他的文献细胞都是12h左右检测的,所...

cdna能够检测microrna吗: 根据你的反转录引物而定。
①如果是普遍反转录引物,则不需要,也就是反转录用一种引物将RNA全部反转成cDNA
然后定量的时候再使用miRNA和对应的普通基因各自的定量引物。
②若使用的是特异性反转录引物
则需要分开反转录,前面的buffer、酶等能混合,最后要分开,加入各自对应的反转录引物。
无论是普遍反转录还是特异性反转录,均可进行后续的定量。貌似特异性引物更精确。

转录组测序能检测microrna吗: 有可能,但是很难测到,因为转录组测序的实验过程值保留mRNA,去除了核糖体RNA,小RNA可能实验过程中会降解掉

qpcr怎么来检测microrna: 提RNA你会吧。。。 反转录你会吧。。。如果只是检测一般的mRNA的表达量 就用poly T反转录就可以了 如果是特殊的必须去另外合成特异引物 如果你想得到确切的浓度值 那必须在做RT的时候检测一个标准品 就是这里面东西的浓度你是确切知道的 然后做一条标准品曲线 然后拿你要检测的那个得到的值带到那个曲线里面就算出浓度了 大部分时候都是检测相对含量 就是这个mRNA在不同东西里面的比较 那就不用做标准品曲线 直接把得到的几个值比较下关系就可以了 大部分检测用的内参都是GAPDH 其他还有U6 U7可选

请问如何设计引物检测microRNA 前体呢: 宜的话,可以设计颈环引物反转录,染料法或者探针法检测。
如果用加尾法反转录,试剂盒就比较贵了。加尾一般染料法检测的多,很少见到探针法检测的

microRNA 荧光素酶检测实验: 你可以尝试多种转染试剂,现在小rna很火,各公司都有针对小rna的转染试剂,说不定就能试到一种特别适合你细胞的试剂,很多会提供试用装,需要申请。退一步讲人鼠很接近,如果仅验证是否为靶关注点在于序列特异性,应该也有很强说服力

microrna和mran提取检测的区别: MicroRNA (miRNA) 是一类由内源基因编码的长度约为22 个核苷酸的非编码单链RNA 分子,它们在动植物中参与转录后基因表达调控。
Messenger RNA (mRNA)——信使核糖核酸,信使RNA是由DNA的一条链作为模板[1] 转录而来的、携带遗传信息的能指导蛋白质合成的一类单链核糖核酸。

microRNA一般是处理细胞多久以后检测的,我用菌感染细胞,检测几个指标。: 不同的miRNA的所引起的最大抑制效果的峰值的时间是不一样的,在你说的这种情况下,我觉得3h是完全可以的。

请教一个问题 一般的RNA-seq能不能检测到miRNA了?? 检测miRNA要专门的small RNA seq???: 不能,miRNA成熟体太短了,在20~24nt左右波动,首先建库前可能就没有将Total RNA中的miRNA保留下来,更不可能去测了,所以通常所说的RNA-Seq就是测一下mRNA而已.
要检测出miRNA,在前期样品提取、样品建库过程上有所改变.

  • note3外屏多少钱

    求问琉璃神社怎么用?一打开就成这样: 文件目录那一串乱码就是种子码 ...

    337条评论 6038人喜欢 5091次阅读 481人点赞
  • 2015谁愿意领养刚出生的宝宝

    城市轨道交通发展的必要性有哪些?: 改革开发以来,国家对城镇化的发展重视程度加大。《中华人民共和国国民经济和社会发展第十二个五年规划纲要》就提出,优化格局促进区域协调发展和城镇化健康发展,积极稳妥推进城镇化进程。2013年,我国城镇化率已经突破53%的...

    373条评论 4510人喜欢 1082次阅读 671人点赞
  • ppt的公式编辑器在哪

    中药师执业资格考试成绩何时查14: 每年的医师考试成绩查询时间不固定,2014年医师资格考试成绩查询时间估计在12月份左右。可参考历年医师资格考试成绩查询时间:  2013年医师成绩查询时间为2013年12月19日;  2012医师考试成绩查询时间为1...

    618条评论 6565人喜欢 4586次阅读 354人点赞
  • dnf女气功和女柔道哪个厉害

    金炉茶具电磁炉显示e3什么意思: 电磁炉出现E3,是由于电网电压有问题(炉盘温度传感器开路)E3保护是电磁炉都有的一种保护(当然,故障显示代码不一定相同),其目的是为了防止热敏电阻支路开路导致温度失控。由于电磁炉中此保护值的设定直接影响电磁炉的低温工...

    559条评论 1990人喜欢 3866次阅读 875人点赞
  • pcr产物能放多久

    魅蓝E3续航能力怎么样: 这款手机支持Cold mCharge快充,30分钟即可充电53%,电池容量为3360mAh。电信新出流魔王卡 每月国内流量6GB,赠送来电显示和189邮箱,国内接听免费,套餐费用19元 需要可以登录电信网厅办理:ht...

    882条评论 1597人喜欢 6444次阅读 586人点赞
  • 1.8l是多少斤

    G3258办公怎么样,和E3差多少:   一颗能唯一能超频的奔腾CPU配不能超频的的B85主板一看就是坑爹的品牌机,或者小白配的超频的CPU至少配Z87主板,不过这款CPU太差了,至少也买四核八线程的E3 1230吧  CPU E3 1230v3+微星B...

    793条评论 6405人喜欢 1781次阅读 761人点赞